ENVIRONMENTAL RESPONSE OF SPORE FORMING BACTERIA: MOLECULAR STUDIES OF FOOD ASSOCIATED CLOSTRIDIA

Abstract

Per varie ragioni, tra cui le loro specifiche condizioni di crescita, la diagnosi di infezione e di contaminazione alimentare da clostridi presenta ancora numerose difficoltà sia a livello clinico-batteriologico che a livello molecolare. In questo lavoro di tesi si è cercato di ampliare lo spettro di conoscenze riguardo i clostridi e la loro diffusione; durante il primo anno di ricerca è stato studiato, applicando nuove tecniche di microscopia, il processo di germinazione di Clostridium tyrobutyricum, uno dei batteri maggiormente responsabili del gonfiore tardivo dei formaggi a pasta dura; l’applicazione di tecniche di Real-Time PCR ha nel contempo reso possibile una determinazione quantitativa dello stesso in latte. Successivamente, è stata condotta un’analisi di tipizzazione molecolare di clostridi nell’ambito di una filiera agro-zoo-casearia finalizzata alle matrici di processo al fine di individuare le possibili vie di diffusione dei microrganismi. La parte finale del lavoro è stata dedicata allo studio di espressione genica di un altro Clostridium responsabile di gonfiore ma scelto perché geneticamente indistinguibile da Clostridium botulinum, ovvero il Clostridium sporogenes; l’analisi trascrizionale dei suoi geni durante le fasi vegetativa, di sporulazione, germinazione ed esocrescita ha permesso di assegnare diverse funzioni a geni singoli o a gruppi di geni allo scopo di utilizzare queste informazioni per formulare ipotesi future anche su altre specie di clostridi patogeni.